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培养基配制,注意事项?

140 2024-03-09 02:49 admin   手机版

一、培养基配制,注意事项?

1.分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口,以免浸湿棉塞, 引起污染。

2.pH不要调过头,以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。

3.需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦。

4.严格按照培养基配方配制

二、AT培养基是什么培养基?

根癌农杆菌是一种高效敏感型生物检测菌株,检测群体感应信号,自体诱导物用β-半乳糖苷酶法进行检测。最适生长温度28℃;在营养琼脂培养基上生长,在AT培养基上做检测 庆大霉素100μg/ml,四环素(2μg/ml),壮观霉素100μg/ml 做检测的时候,温度不要超过28℃,培养时间不应超过48小时,在X-gal 的ABM培养基上有蓝色产生。

三、总结配置培养基的注意事项?

  这里主要归纳一般情况下的培养基配制关键点,因为培养基的配制使用非常重要,从一开始就该避免异常的出现,主要有以下几个方面。

  (1)溶化:一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水分。

  在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏.

  (2) 校正酸碱度(调节pH):培养基必须有适当的pH.因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃.调节pH可用无菌的 1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液.当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液.灭菌后 的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。

  因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的 pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节.干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证.测定时,一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正.调 整pH后要加热过滤,使培养基澄清.

  (3)培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认.每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管.

  固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管.

  平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min.让水蒸汽自然蒸发。

  斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染.

  高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。

  分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理.液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中.

  培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定.普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌 15min,但容器和装量较大时,应延长至20min.含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min.含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血 清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌.血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿 素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌.

  高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到 全部杀灭微生物.以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好

四、食品营养培养基制作注意事项?

在制备培养基的过程中,首先要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用。

五、msd培养基是什么培养基?

msd培养基是烟草培养基。msd培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。

六、CM培养基是什么培养基?

完全培养基;complete medium;CM 分子式:CAS号:性质:可满足某微生物的各种营养缺陷型菌株生长需要的天然或半合成培养基。一般可在基本培养基中加入一些富含氨基酸、维生素和核苷酸之类的天然物质(如蛋白胨或酵母膏等)配制而成。完全培养基与基本培养基相互配合可分离、筛选微生物的营养缺陷型突变株。

七、im培养基是什么培养基?

IMDM培养基是一种高度富集的合成培养基,非常适用于快速增殖的高密度细胞培养,包括 Jurkat、COS-7 和巨噬细胞。我们针对广泛的细胞培养应用,提供了大量 IMDM 改良培养基。

IMDM,经典培养基

IMDM,不含氨基酸

IMDM,不含维生素

IMDM,不含葡萄糖

IMDM,不含葡萄糖和丙酮酸

IMDM,不含L-谷氨酰胺

IMDM,不含酚红

八、霉菌培养基叫什么培养基?

霉菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基;酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基;霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和察氏培养基等。每一种微生物所需的成分是不一样的,温度、湿度、pH等都有影响.

九、ms培养基是什么培养基?

MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。

十、PD培养基是什么培养基?

PD培养基是马铃薯葡萄糖培养基的简称,对应马铃薯、葡萄糖的英文。

200 g马铃薯,洗净去皮切片,加水1000 mL煮沸15 min,纱布过滤后加水补足至1000 mL,再加12g葡萄糖,煮沸至固体充分溶解后分装。分装后的培养基应在1 h内灭菌,采用高压蒸汽湿热灭菌,在0.1 MPa蒸汽压下,温度达121 ℃,维持20 min。

用来培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌

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